重组免疫毒素hIL2-Luffin P1的构建、表达及鉴定

作者：刘树雷; 何威; 王儒鹏; 吴军; 张小容; 赵云

来源：免疫学杂志, 2008, (03): 315-317+321.

• 免疫毒素
• 人白介素2
• Luffin P1
• 肿瘤靶向治疗

目的构建、诱导表达并鉴定可用于特异性杀伤皮肤T细胞淋巴瘤的免疫毒素hIL-2-Luffin P1。方法采用基因工程技术将重组基因片段hIL-2-Luffin P1克隆入新的表达载体pET32a(+)中,经酶切及DNA序列测定进行鉴定并证实正确后,转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达hIL-2-Luffin P1融合蛋白,行Western blot用His标签抗体和鼠抗人IL-2抗体对该融合蛋白进行鉴定。结果成功构建了重组免疫毒素表达载体pET32a(+)-hIL-2-Luffin P1,经Western blot鉴定证实诱导表达的重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1融合蛋白的正确。结论重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1的成功构建为进一步研究其对皮肤T细胞淋巴瘤的杀伤作用奠定了实验基础。

• 单位
  第三军医大学附属新桥医院; 西南医院