摘要
目的探讨线粒体钠钙交换体(mitochondrial Na+/Ca2+exchanger,NCLX)介导的线粒体钙稳态对肝癌细胞生长的影响。方法真核表达载体pSliencer3.0-shNCLX、pcDNA3.1(+)-NCLX分别转染肝癌细胞SNU-739和SNU-368,构建稳定干涉和过表达NCLX肝癌细胞。采用免疫印迹法检测转染后肝癌细胞中NCLX蛋白的表达,Rhod-2-AM染色检测肝癌细胞线粒体钙水平,MTS和EdU实验检测肝癌细胞增殖能力,流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡情况。结果免疫印迹法检测结果显示成功构建干涉和过表达NCLX的SNU-739和SNU-368肝癌细胞。与转染空载体肝癌细胞比较,干涉NCLX后肝癌细胞SNU-739和SNU-368线粒体钙明显增多(P<0.01),细胞增殖率明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显下降(P<0.01);而过表达NCLX后肝癌细胞SNU-739和SNU-368线粒体钙明显减少(P<0.05),细胞增殖率明显下降(P<0.05),细胞凋亡率明显上升(P<0.01)。结论干涉NCLX诱导的线粒体钙水平升高可促进肝癌细胞增殖和抑制凋亡,而过表达NCLX诱导的线粒体钙水平下降抑制肝癌细胞增殖和促进凋亡,NCLX可能是肝癌的潜在治疗靶点。
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单位基础医学院; 中国人民解放军空军军医大学