细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用

作者：刘英鹏; 田蕾; 王国鹏; 王建亭; 李泽文; 罗凌惠; 龚树生

来源：华中科技大学学报(医学版), 2007, 36(4): 548-550.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2007.04.038

• 腺病毒载体
• 细菌内同源重组
• 基因转移

目的 通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒.方法 质粒pAdTrack酶切线性化后,通过电转化方法转化AdEasier细菌,线性化的腺病毒重组质粒转染293包装细胞后获得重组腺病毒,观察腺病毒感染喉癌细胞Hep-2后的报告基因表达情况及病毒对培养细胞生长的影响.结果 构建的重组腺病毒经酶切电泳鉴定正确;扩增的腺病毒转染培养的Hep-2细胞8 h后即开始表达报告基因,48 h后全部细胞均有报告基因表达;该重组的腺病毒对培养Hep-2细胞生长无明显影响.结论 通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒,方法简单、成功率高、实验周期短.

• 单位
  首都医科大学; 华中科技大学同济医学院附属协和医院