猪捷申病毒8型rVP1-ELISA检测方法的建立

作者:胡峰; 刘杉杉; 蔺文成; 王晓玲; 张超范; 王朝; 刘朝霞; 胡泉博; 崔尚金
来源:中国兽医科学, 2012, (03): 258-263.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2012.03.009

摘要

为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性血清特异性识别。以纯化的重组蛋白包被ELISA反应板,建立了检测PTV抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果表明,重组VP1蛋白与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒阳性血清不发生反应。敏感性试验结果表明血清稀释至1∶800时仍检测为阳性。该方法的批内、批间变异系数均小于...

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