一株铜绿假单胞菌的分离鉴定及其对VPAHPND拮抗效果的评价

作者:刘学实; 蒋葛; 沈辉*; 乔毅; 成婕; 曹晓慧; 窦雅斌; 温梦莹; 万夕和; 王李宝; 黎慧; 史文军
来源:南京师大学报(自然科学版), 2023, 46(01): 73-87.
DOI:10.3969/j.issn.1001-4616.2023.01.011

摘要

近年来,急性肝胰腺坏死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)造成了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖业巨大的经济损失,其病原为一类含有致病基因PirAB的弧菌(Vibrio),主要为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VPAHPND).本研究以VPAHPND为受试菌株,从江苏海域捕获的黄姑鱼(Nibea albiflora)体内分离筛选对VPAHPND具有抑制作用的拮抗菌株.通过形态学、生理生化及分子生物学方法进行鉴定,研究了其拮抗效果、拮抗活性物质,并对生物安全性和被动保护效果进行评估.结果表明,分离筛选出1株具有良好拮抗效果的菌株JSHY97,经鉴定该菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa).该菌株对3株具有不同分型的VPAHPND均具有良好的拮抗效果,其抑菌圈直径达19.25 mm~21.80 mm,初步判断其活性物质来源于胞外产物.口服JSHY97的凡纳滨对虾的7 d保护率也达到80%,拮抗组的凡纳滨对虾体内的毒力基因PirA拷贝数显著低于对照组(P<0.05).安全性实验表明JSHY97对斑马鱼(Brachydanio reriovar)和凡纳滨对虾无毒力.由此表明,本研究得到的铜绿假单胞菌菌株JSHY97对VPAHPND具有较好的抑制作用,为AHPND的防治提供了新的菌株资源.

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