摘要
目的:利用基因间长链非编码RNA-EPS(long intergenic non-coding RNA-EPS,lincRNA-EPS)基因敲除小鼠模型研究lincRNA-EPS对牙釉质发育的影响。方法:应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分析方法鉴定lincRNA-EPS基因敲除小鼠的基因型;微型CT(micro-CT)检测8周龄lincRNA-EPS基因敲除小鼠和野生型小鼠下颌磨牙区的形态;扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察下颌磨牙区釉质的微观结构;X线及X射线能谱分析(energy dispersive X-ray spectroscopy,EDX)检测釉质矿化程度的改变;体视显微镜下分离PN0.5小鼠下颌第一磨牙牙胚;实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术检测其釉质发育相关基因AMELX、ENAM、AMBN、AMTN的mRNA表达量。结果:与野生型小鼠相比,micro-CT图像显示lincRNA-EPS基因敲除小鼠下颌磨牙舌侧出现大面积釉质缺损,舌侧牙尖磨耗成凹坑状;SEM结果显示,lincRNAEPS基因敲除小鼠釉质结构紊乱,釉柱内羟基磷灰石晶体间存在间隙;lincRNA-EPS基因敲除小鼠下颌磨牙牙胚中,AMELX、ENAM、AMBN、AMTN的mRNA表达量较野生型小鼠显著降低,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论 :LincRNA-EPS的缺失导致釉质发育相关基因表达下调,并引起牙釉质结构的紊乱,最终导致了釉质结构的缺损,证明lincRNA-EPS在牙釉质发育过程中具有重要作用。
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单位同济大学; 同济大学附属口腔医院