人诱导多能干细胞体外扩增生成红系集落并构建红系祖细胞株的研究

作者：孟强; 王世春; 王甜甜; 陈艺心; 张强; 黄梅莓; 赵树铭

来源：中国输血杂志, 2015, 28(05): 493-497.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2015.05.005

• 人诱导多能干细胞
• 红系集落
• 红系祖细胞株
• 滋养层细胞共培养
• 体外扩增
• 诱导因子

目的将人诱导多能干细胞(hi PSCs)分化成为红系祖细胞并构建稳定的红系祖细胞株。方法采用与滋养层细胞共培养的方式,添加10 ng/m L的TPO、5 U/m L的EPO、25 ng/m L的SCF、5 ng/m L的Flt-3、20 ng/m L的IL-3的诱导因子,诱导hi PSCs分化成为红系集落,构建稳定的红系祖细胞株;倒置显微镜观察获得的细胞株形态,瑞氏染色并计数,MTT法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞表面标志物。结果 hi PSCs诱导构建的红系祖细胞株遗传性状稳定并可长期传代,细胞呈集落样生长,外观上与正常红系祖细胞无差异。分类计数构建的红系祖细胞株比例(%):P0与P5代细胞为84.90±4.93 vs 72.20±6.24(P<0.05);流式检测,hi PSCs诱导构建的红系祖细胞株细胞表面标志物CD235a阳性率(%)表达:P0与P5代细胞为3.02±0.75 vs 5.87±0.37(P<0.05)。结论诱导hi PSCs生成的红系祖细胞株在表面标志继承性和遗传性状方面都是稳定的。

• 单位
  第三军医大学第一附属医院