迷迭香酸衍生物RAD-9调控人食管癌EC9706细胞增殖、凋亡的作用观察及机制探讨

作者：李一鸣; 李恒; 孙菡^*

来源：临床和实验医学杂志, 2018, 17(21): 2275-2280.

• 人食管癌
• 迷迭香酸衍生物
• 增殖
• 凋亡
• 调控机制

目的观察迷迭香衍生物RAD-9对人食管癌EC9706细胞增殖、凋亡的调控作用,并探讨其调控机制。方法将EC9706细胞培养至对数期,调整细胞浓度2×106个/孔,随机分为4组,各3个复孔。细胞贴壁后,N组、A组、B组、C组分别用磷酸盐缓冲液(PBS)、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L RAD-9 20μl干预。对比干预24 h、48 h、72 h后各组增殖抑制率及细胞凋亡率; Hoechst 33258染色观察干预72 h后细胞形态学变化;对比干预72 h后血管内皮生长因子(VEGF)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、转化基因(P21) mRNA和蛋白相对表达量;并对比干预72 h后B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3) mRNA和蛋白相对表达量。结果 B组增殖抑制率显著高于A组和C组(P <0. 05),C组增殖抑制率显著高于A组(P <0. 05); A、B、C组增殖抑制率均随时间的延长显著增加(P <0. 05); Hoechst 33258染色观察,A、B、C组部分细胞体积缩小、染色质固缩细胞呈现不规则形态,呈现亮蓝色凋亡小体,且B组凋亡现象最为明显;凋亡率、P21、Bax、Caspase3 mRNA和蛋白相对表达量组间比较,B组最高、C组其次、A组更低、N组最低,其中每两组间比较差异均显著(P <0. 05); A、B、C组凋亡率均随时间的延长显著升高(P <0. 05),N组凋亡率随时间延长变化趋势不明显(P> 0. 05); VEGF、PI3K、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量组间比较,B组最低、C组其次、A组更高、N组最高,其中每两组间比较差异均显著(P <0. 05)。结论RAD-9可抑制人食管癌EC9706细胞的增殖、促进其凋亡,其中50μmol/L的效果最佳,推测机制与下调VEGF、PI3K、Bcl-2 mRNA和蛋白、上调P21、Bax、Caspase3 mRNA和蛋白表达有关。

• 单位
  陕西中医药大学第二附属医院; 西安市第三医院