沙门菌属pad蛋白的原核表达及抗原性的鉴定

作者：陈超; 卢永峰; 刘慧莹; 宋立华; 左庭婷; 何君; 檀华; 朱虹; 端青

来源：军事医学, 2011, (08): 593-595.

• 沙门菌属
• pad蛋白
• 原核表达
• 抗原性 Salmonella
• possible outer membrane adhesin
• prokaryotic expression
• antigenicity

目的在大肠杆菌中表达沙门菌属pad蛋白,纯化后制备兔抗pad抗体。方法利用PCR方法从肠炎沙门菌中扩增出pad基因,构建pET-32a(+)-pad重组表达质粒;将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选阳性克隆,测序鉴定后,优化IPTG浓度、诱导温度和诱导时间以诱导重组蛋白的表达;以纯化的pad蛋白免疫家兔,制备抗pad多克隆抗体并进行鉴定。结果与结论成功扩增得到pad基因,经双酶切和测序证实重组表达质粒构建成功,经过诱导条件的优化,在大肠杆菌中表达出相对分子质量为41×103的目的蛋白;纯化的重组蛋白免疫家兔后,能够有效地刺激家兔产生特异性抗体,经琼脂糖双向扩散测定抗血清效价达...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院