摘要
为了解枇杷有色体特异番茄红素β-环化酶基因(CYC-B)的序列及表达特点,本研究以‘大五星’(红肉)和‘川农1-5-9’(白肉)枇杷为材料,采用同源克隆法,从枇杷果实中克隆了类胡萝卜素生物合成途径中关键酶基因之一(CYC-B的c DNA全长序列),运用生物学软件对该序列及推导的氨基酸序列进行相关生物信息学分析,同时利用荧光定量PCR技术探究CYC-B基因在枇杷果实不同发育时期的表达模式。结果显示,该基因全长1 579 bp,具有1 491 bp的完整开放阅读框,编码496个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,该基因编码的氨基酸序列与白梨(XP009377819.1)和苹果(Malus domestica) CYC-B基因(XP008361015.1)的同源性分别高达98%和97%,由此推测这个基因属于枇杷CYC-B基因(EjCYC-B)。荧光定量PCR分析结果表明,随着枇杷果实的发育,EjCYC-B的表达量明显增加,且不同发育阶段EjCYC-B基因的表达存在显著变化;其中,在果皮和果肉中的表达分别在黄熟期和成熟期达到最高峰。因此可以推测,EjCYCB在枇杷类胡萝卜素合成中,参与调控,并存在一定的作用机理,使得枇杷的果皮、果肉在不同发育阶段的呈色不同。本研究结果可为深入认识CYC-B调控类胡萝卜素合成机理提供基础。
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