ST2负向调控铜绿假单胞菌外膜囊泡诱导肺上皮细胞分泌细胞因子

作者:郭艳飞; 徐昌健; 段乐平; 任群峰*
来源:中国临床药理学杂志, 2022, 38(11): 1185-1189.
DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.11.007

摘要

目的 研究受体分子ST2在铜绿假单胞菌外膜囊泡(OMVs)诱导肺上皮细胞分泌促炎细胞因子中的负向调控作用。方法 将气道上皮细胞BEAS-2B分为对照组和低、中、高浓度实验组。对照组给予等体积磷酸盐缓冲液刺激;低、中、高实验组分别用1,10和30μg·mL-1的OMVs刺激。用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法分别检测ST2 mRNA和蛋白的表达水平,用Western blot法检测细胞核内p65、H3和H4乙酰化,用酶联免疫吸附实验法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的分泌,用染色质共沉淀检测组蛋白和ST2启动子的结合,用荧光素报告基因测定核转录因子κB(NF-κB)的酶活性。结果 BEAS-2B细胞经OMVs处理后,低、中、高浓度实验组均可导致ST2转录水平和翻译水平明显增高,并能上调细胞核内p65的表达水平以及细胞核内H3和H4乙酰化;同时,低、中、高浓度实验组的TNF-α和IL-8分泌水平也显著增高。染色质共沉淀结果显示,H3和H4组蛋白能和ST2启动子区域结合。报告基因结果也显示,ST2能和NF-κB启动子结合,并抑制NF-κB的活性。结论 铜绿假单胞菌OMVs经NF-κB诱导ST2表达,后者可抑制NF-κB的活性以及TNF-α和IL-8分泌。

  • 单位
    郴州市第一人民医院

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