大肠杆菌脂多糖对小鼠骨髓间充质干细胞炎症因子分泌的影响

作者：张志翔; 曹颖光; 徐恋祎^*

来源：临床口腔医学杂志, 2020, 36(12): 707-711.

• 脂多糖
• 骨髓间充质干细胞
• 炎症因子
• 免疫调节

目的:探讨大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)炎症细胞因子分泌的影响。方法:全骨髓贴壁法提取并培养小鼠BMSCs,CCK-8法检测LPS对BMSCs的毒性作用,用LPS(1μg/mL)激发小鼠BMSCs炎症反应,继续培养1 h,8 h,24 h后,qPCR法检测细胞白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β),白细胞介素10(interleukin-10,IL-10),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA的表达水平;Western Blot法分析细胞内IL-1β,IL-10,TNF-α蛋白的表达情况;ELISA法分析细胞上清中IL-1β,IL-10,TNF-α蛋白的表达情况。结果:CCK-8结果显示1μg/mL LPS处理对BMSCs无毒性作用;qPCR结果显示TNF-α,IL-1β,IL-10的表达均有不同程度增加,其中TNF-αmRNA的表达在诱导1 h后便显著上调,随后逐渐下降,IL-10和IL-1βmRNA的表达在1～8 h内逐渐上调,随后(8～24 h)下降;Western Blot结果显示:TNF-α和IL-1β蛋白的表达在1～8 h内增加,随后减少,IL-10蛋白的表达在24 h内逐渐增加;ELISA结果显示:TNF-α蛋白的表达在1～8 h内均显著增加,随后逐渐减少,IL-1β,IL-10蛋白的表达在24 h内均逐渐增加。结论:LPS刺激上调了BMSCs促炎因子IL-1β,TNF-α,抑炎因子IL-10的表达,不同细胞因子的表达在时间上存在先后顺序,这可能与BMSCs通过自身免疫调节机制(促炎/抑炎轴)分泌细胞因子来调节炎症过程有关。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院