Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1对白细胞介素-6/信号转导与转录激活因子3信号通路的影响

作者：杨树; 范静婧; 马斌林^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(04).

• 乳腺癌
• 白细胞介素-6
• 信号转导与转录激活因子3信号通路

目的探索三阴性乳腺癌中Rab27A蛋白调控转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)对白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法通过生信分析Rab27A与ZEB1在三阴性乳腺癌中表达, 在体外培养三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MDA-MB-468)使用慢病毒转染技术进行Rab27A、ZEB1过表达及敲减, 并通过回复实验构建Rab27A过表达ZEB1敲减、Rab27A敲减ZEB1过表达的三阴性乳腺癌细胞系。运用蛋白质印迹法(Western blot)验证其蛋白表达。通过免疫印迹技术研究Rab27A调控ZEB1对IL-6/STAT3信号通路的影响, Shapiro-Wilk检测实验数据均服从正态分布。结果在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中, 蛋白质印迹法(Western blot)结果显示, ZEB1过表达组高于阴性对照组, 差异有统计学意义(0.607±0.019比0.460±0.073, F=124.111, P<0.05), Rab27A敲减组低于阴性对照组, 差异有统计学意义(0.118±0.003比0.460±0.073, F=124.111, P<0.05), ZEB1敲减组低于阴性对照组且有统计学意义(0.156±0.048比0.460±0.073, F=124.111, P<0.05)。在三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞系中, 蛋白质印迹法(Western blot)结果显示Rab27A过表达组高于阴性对照组, 差异有统计学意义(0.735±0.007比0.667±0.006, F=1 859.845, P<0.05), ZEB1过表达组高于阴性对照组, 差异有统计学意义(0.905±0.014比0.667±0.006, F=1 859.845, P<0.05), Rab27A敲减组低于阴性对照组, 差异有统计学意义(0.310±0.002比0.667±0.006, F=1859.845, P<0.05), ZEB1敲减组低于阴性对照组, 差异有统计学意义(0.278±0.003比0.667±0.006, F=1 859.845, P<0.05)。Rab27A过表达时ZEB1表达量高于ZEB1阴性对照组表达量, 差异有统计学意义(0.735±0.007比0.905±0.014, F=1 859.845, P<0.05), Rab27A敲减时ZEB1表达量低于ZEB1阴性对照组, 差异有统计学意义(0.310±0.002比0.278±0.003, F=1 859.845, P<0.05)。在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中, Rab27A过表达时IL-6/STAT3信号通路被显著激活(2.010±0.092比1.440±0.089, F=196.692, P<0.05), 三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞系中, 结果与MDA-MB-231相同(1.963±0.007比1.282±0.011, F=2 211.290, P<0.05)。在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中。在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系中, Rab27A能回复ZEB1过表达时对IL-6/STAT3信号通路有激活趋势, 差异有统计学意义(1.808±0.053比1.440±0.089, F=196.692, P<0.05), 在三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞系中, Rab27A能回复ZEB1过表达时对IL-6/STAT3信号通路有激活趋势, 差异有统计学意义(1.545±0.007比1.282±0.011, F=2 211.290, P<0.05)。结论在三阴性乳腺癌中Rab27A通过正向调控ZEB1的表达可激活IL-6/STAT3信号通路。

• 单位
  新疆医科大学附属肿瘤医院