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摘要
目的：观察芹菜素对人大肠癌CL187细胞增殖和凋亡的作用及相关机制。方法：选择人大肠癌CL187细胞，利用芹菜素(0、30、45、60 mg·L-1)进行干预后，采用噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成实验检测芹菜素对CL187细胞的增殖作用；Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡；实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测芹菜素对CL187细胞胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)观察芹菜素对细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路中Akt、磷酸化(p)-Akt及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、p-ERK1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达的影响。结果：与空白组比较，芹菜素组细胞存活率显著降低，细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01)；与空白组比较，芹菜素组细胞克隆数和克隆形成率显著降低，克隆形成抑制率显著升高(P<0.01)；不同浓度芹菜素干预CL187细胞48 h，与空白组比较，在荧光显微镜下可观察到细胞核固缩，染色质凝聚，细胞荧光反应增强等典型的细胞凋亡特征；与空白组比较，芹菜素组(45、60 mg·L-1)抑凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)，芹菜素组促凋亡基因Bax和Caspase-3mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较，芹菜素组促凋亡蛋白Caspase-3蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01)，芹菜素组(45、60 mg·L-1)促凋亡蛋白Bax蛋白表达显著上调(P<0.01)，芹菜素组抑凋亡蛋白Bcl-2表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较，芹菜素组(60 mg·L-1)Akt蛋白表达显著下调(P<0.01)，芹菜素组(45、60 mg·L-1)p-Akt、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达显著下调(P<0.01)，芹菜素组JNK、p-JNK蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01)，芹菜素组(60 mg·L-1)p38 MAPK蛋白表达明显上调(P<0.05)，芹菜素组p-p38 MAPK蛋白表达显著上调(P<0.01)，芹菜素组p-Akt/Akt明显降低(P<0.05,P<0.01)，芹菜素组p-ERK1/2/ERK1/2显著降低(P<0.01)，芹菜素组(45、60 mg·L-1)p-JNK/JNK明显升高(P<0.05,P<0.01)，芹菜素组p-p38 MAPK/p38 MAPK显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论：芹菜素可抑制大肠癌CL187细胞增殖并促进细胞凋亡，其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路和调控MAPK信号通路相关蛋白的表达有关。
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