福氏志贺菌主动外排基因acrA的克隆及原核表达

作者：王松泰; 张继瑜; 魏小娟; 付元芳; 曹小安; 邱昌庆

来源：中国人兽共患病学报, 2008, (10): 933-936.

• 福氏志贺菌
• acrA基因
• 克隆
• 原核表达 Shigella flexneri 2a
• acrA gene
• cloning
• prokaryotic expression

目的对福氏志贺菌外排基因acrA进行克隆和原核表达,为进一步研究其在志贺菌外排机制中的作用奠定基础。方法参考福氏志贺菌2aacrA基因序列设计一对特异引物,在引物的5′和3′端分别加入含有BamHⅠ和SalⅠ限制性酶切位点序列。以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增acrA基因并与pMD18-T载体连接,然后转化DH5α。提取重组质粒pMD18-acrA,经BamHI/SalI双酶切并与载体pET30a连接后转化宿主菌BL21(DE3)pLys,通过IPTG诱导表达目的蛋白。结果克隆的acrA基因长度为1122bp,核苷酸序列与GenBank上公布的序列完全相同。原核表达经SD...