摘要
目的探讨神经生长因子(NGF)通过调节Sirt1蛋白表达对足细胞凋亡保护的作用机制,为临床治疗提供新的生物靶点。方法培养离体分化成熟的肾小球足细胞,转染空白RNA(con siRNA)或siNGF质粒,通过免疫印迹法测定Sirt1和凋亡表达蛋白Cleaved Caspase3的蛋白量,并观察给予不同浓度NGF刺激后上述蛋白的变化水平,观察NGF与Sirt1的相互关系及对足细胞的作用。结果分化良好的足细胞给予不同浓度的NGF刺激后,可见随着NGF浓度增加组蛋白去乙酰酶Sirt1的蛋白表达也增加;使用ViaFectTM转染试剂盒给足细胞转染(con siRNA)和siNGF,通过免疫印迹验证沉默NGF的表达,结果显示在siNGF沉默NGF表达组Sirt1蛋白表达降低,足细胞凋亡发生增多。而同时对siNGF组的细胞给予NGF刺激,与siNGF组比较,Cleaved Caspase3的蛋白表达减少,足细胞凋亡发生缓解。结论 NGF通过增加Sirt1的表达对足细胞发挥保护作用,NGF/SIRT1轴可能成为一个新的干预足细胞损害的治疗靶点。
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单位宁夏回族自治区人民医院; 西北民族大学