siRNA电转化幽门螺杆菌抑制空泡毒素基因mRNA表达

作者：赵刚; 严燕国; 马晋平; 彭俊生; 董文广; 蔡世荣; 何裕隆; 詹文华

来源：中国病理生理杂志, 2007, (11): 2244-2247.

• 电转化
• 螺杆菌,幽门
• RNA干扰
• 基因,VacA

目的:利用RNA干扰(RNAi)技术原理,优化小分子干扰RNA(siRNA)电转化幽门螺杆菌(Hp)的条件,并观察电转化后空泡毒素基因(VacA)的mRNA表达是否受到抑制。方法:合成5对特异siRNA为实验组:S1、S2、S3、S4、S5,1对非特异siRNA为对照组:S6。设定不同的电场强度及脉冲时间,探索电转化Hp的最佳条件,并观察转化效率和电转化后Hp存活率。在最佳电转化条件下将上述6对siRNA转化Hp,在不同时点通过RT-PCR方法检测VacA mRNA的抑制率。结果:电场强度和脉冲时间是影响电转化效率的2个关键因素,在25kV/cm电场强度下脉冲6ms时,电转化效率最高达91%,S2、S4组在转化后VacA mRNA抑制率分别为65%和77%。结论:适当的场强和脉冲时间的组合可使转化效率达到最大值。靶向siRNA可以抑制HpVacA的mRNA表达。

• 单位
  广东省人民医院; 中山大学