莫海威芽孢杆菌产壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质分析

作者：刘进杰; 吕娟娟; 陈国忠; 张娟; 程仕伟; 冯志彬^*

来源：江苏农业科学, 2019, 47(14): 231-235.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2019.14.054

• 壳聚糖酶
• 莫海威芽孢杆菌
• 分离纯化
• 酶学性质
• 底物特异性

纯化从烟台海域沙质土壤分离得到的莫海威芽孢杆菌菌株amyP216来源壳聚糖酶,并对其进行酶学性质分析。以发酵液为原料,依次进行超声波破碎菌体、20%～70%硫酸铵分级盐析、纤维素DE-32阴离子交换层析、葡聚糖凝胶G-75过滤层析,得到壳聚糖酶。采用SDS-PAGE凝胶电泳测定分子量为30 ku,全波段扫描结果显示在324 nm处出现最高峰。然后对壳聚糖酶的酶学性质进行研究。结果表明,最适反应温度为55℃,且在一定范围内温度越低,其热稳定性越高;最适反应pH值为5.5,中性条件下酶活性最稳定;在金属离子中Mn2+对其激活作用最明显,其他金属离子对其有抑制作用;该酶具有相对较好的底物特异性。

• 单位
  生命科学学院; 鲁东大学