基因工程抗体抗CD19(Fab)-LDM的制备及生物学活性研究

作者：姜琳琳; 张孝云; 马莉; 颜次慧; 齐怀丰; 熊冬生; 范冬梅

来源：中国药理学通报, 2013, 29(10): 1363-1368.

• CD19
• 力达霉素
• B性恶性淋巴瘤
• 基因工程抗体
• DNA损伤
• 强化融合蛋白 CD19
• LDM
• B lymphoma cells
• genetic engineering antibody
• DNA damage
• energized fusion protein

目的构建及表达抗CD19(Fab)-LDP(LDP为LDM辅基蛋白)融合蛋白,制备强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM,进行体外生物活性的研究。方法采用基因克隆技术,构建基因重组质粒pAZYanti-CD19(Fab)-LDP,测序进行鉴定,转化至大肠杆菌进行表达,表达产物经Protein G亲和层析柱纯化后,进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定;采用流式细胞检测技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白与B淋巴瘤Raji细胞的结合活性;采用间接免疫荧光法,检测CD19介导细胞内化的情况;采用MTT法检测强化融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对...

• 单位
  实验血液学国家重点实验室; 中国协和医科大学; 中国医学科学院