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摘要
目的 :探讨膜片钳实验中大鼠心肌细胞分离过程中影响细胞活性和钙耐受性的各种影响因素。方法 :采用Langendorff灌流 ,先用台氏液灌流 30s ,再用无钙台氏液灌流 5～ 7min ,其后换含胶原酶Ⅰ 0 .1～ 0 .2g/L的低钙酶液消化约 8～ 30min ,最后用无钙台氏液冲洗心脏 2min ,剪下心肌组织 ,KB液中 37℃剪碎吹打温育 5min后 ,用 2 0 0μm筛网过滤 ,室温静置换液后进行膜片钳实验。 结果 :注意控制水 ,酶 ,温度等各种因素后 ,可得到杆状、横纹清晰、膜良好的耐钙心肌细胞。结论 :大鼠心肌细胞分离过程中各种因素控制好后可以保证一定的细胞成活率及其质量 ,有利于膜片钳实验的顺利进行
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