cox-2 siRNA表达载体的构建及在HuH-7细胞中的表达

作者：赵清涛; 岳树强; 崔欣; 崔忠; 张利辉; 窦科峰

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2007, (05): 479-481.

• 肝肿瘤
• RNA干扰
• 环氧化酶-2
• 基因表达
• PEG2

目的构建COX-2 siRNA特异性表达载体,观察其对HuH-7细胞中COX-2表达及产生PGE2的影响。方法基于人COX-2基因核苷酸序列,软件分析并选择两靶序列,设计合成发夹结构形成单位,然后将其克隆入pSIREN-Shuttle载体。重组质粒用于瞬时或稳定转染HuH-7细胞,RT-PCR、Western blot用于检测Cox-2的表达,并测定转染前后PEG2的浓度。结果合成的COX-2 siRNA表达载体瞬时转染HuH-7细胞后在mRNA及蛋白水平明显抑制COX-2的表达,稳定转染后则完全阻抑Cox-2的表达,并能抑制PEG2的生成。结论构建的Cox-2 siRNA表达载体具有高效的基...

• 单位
  第四军医大学; 中国人民解放军白求恩国际和平医院; 西京医院