Exendin-4对高糖培养肾小球系膜细胞ECM分泌的影响及相关机制

作者：林晓璐; 张红; 夏小慧; 陈娟; 张日东; 章向成; 李伟

来源：国际内分泌代谢杂志, 2016, 36(5): 302-307.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-4157.2016.05.05

• Exendin-4
• 肾小球系膜细胞
• 炎症
• 核因子-κB

目的 研究exendin-4对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)细胞外基质分泌的影响及相关机制.方法 体外培养GMCs,分为4组:正常对照组(NC组)、正常对照+exendin-4组(NCE组)、高糖组(HG组)、高糖+exendin-4组(HGE组);HGE组细胞分别给予3,5,10,15,30 nmol/Lexendin-4培养12,24,48 h,采用细胞增殖与活性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK8)法测定细胞增殖情况,确定exendin-4的最适作用时间与浓度.ELISA测定细胞上清中细胞外基质蛋白纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原蛋白水平.RT-PCR检测FN、Ⅳ型胶原蛋白及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1) mRNA的表达.Western印迹测定核因子-κB的表达.结果 (1)高糖培养的GMCs给予10 noml/L exendin-4培养24h后,其细胞增殖率较3 nmol/L、5 nmol/L的exendin-4明显降低(F=120.808,P＜0.05);与15 nmol/L、30 nmol/L相比,10 noml/L(HGE组)的exendin-4对GMCs增殖率无明显变化(P均＞0.05).(2)与NC组、NCE组相比,HG组FN、Ⅳ型胶原蛋白分泌及mRNA以及MCP-1、TNF-α、ICAM-1、TGF-β1 mRNA的表达均显著升高(F =6.894～166.914,P均＜0.05);与HG组相比,HGE组FN、Ⅳ型胶原蛋白分泌及mRNA以及TNF-α、MCP-1、ICAM-1、TGF-β1 mRNA表达量明显降低(F=6.894～166.914,P均＜0.05).(3)与NC组、NCE相比,HG组核因子-κB蛋白的表达明显增多(F=133.1,P＜0.05).与HG组相比,HGE组核因子-κB蛋白的表达则明显受到抑制(F=133.1,P＜0.05).结论 Exendin-4抑制高糖培养GMCs的细胞外基质分泌,与其抑制核因子-κB介导的炎性反应有关.

• 单位
  南京医科大学; 徐州医科大学; 徐州医学院附属医院