国产阳离子交换介质Nanogel 50SP在诺如病毒样颗粒纯化中的适用性研究

作者:张生琰; 王玢; 邵志伟; 孙燕; 秦海艳; 杨俊杰; 李薇*; 雷清*
来源:微生物学免疫学进展, 2020, 48(06): 25-29.
DOI:10.13309/j.cnki.pmi.2020.06.005

摘要

目的评价国产阳离子交换介质Nanogel 50SP在诺如病毒样颗粒(Norovirus virus-like particles,NV-VLPs)纯化中的适用性。方法观察并比较两种介质Nanogel 50SP和Poros 50HS在显微镜下的形态。比较Nanogel 50SP层析柱和Poros 50HS层析柱对NV-VLPs粗纯液的上样载量及两种层析柱纯化NV-VLPs粗纯液的工艺,比较Nanogel 50SP层析柱纯化NV-VLPs粗纯液工艺的稳定性。结果 Nanogel 50SP介质形态大小较Poros 50HS更为均一。上样35个柱体积(column volume,CV)之前,Nanogel 50SP层析柱流穿液中目的蛋白纯度低于Poros 50HS层析柱,而在上样35 CV之后,Nanogel 50SP层析柱上的流穿液中目的蛋白纯度高于Poros 50HS层析柱。纯化同一批NV-VLPs粗纯液时,Nanogel 50SP层析柱收获目的蛋白的回收率稍高于Poros 50HS层析柱。3组重复纯化工艺所得目的蛋白纯度均为100%,粒径分布均符合要求,目的蛋白回收率分别为46.00%、41.98%及44.21%。结论国产阳离子交换介质Nanogel 50SP适用于NV-VLPs的小试规模纯化,且纯化工艺有较好的稳定性。

  • 单位
    兰州生物制品研究所有限责任公司

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