摘要
[目的]筛选参与四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肠道损伤以及蒙药红花清肝13味丸治疗过程的重要信号通路及基因。[方法]将18只6~8周龄、体重为20~22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,即空白对照组(n=6)、模型组(n=6)和治疗组(n=6)。空白对照组与模型组每天灌胃1次生理盐水,剂量为10 m L/(kg·BW),连续7 d;治疗组每天灌胃1次红花清肝13味丸,剂量为616.5 mg/(kg·BW),连续14 d;最后一次灌胃4 h后,空白对照组腹腔注射橄榄油,模型组和治疗组腹腔注射CCl4橄榄油混合物(CCl4∶橄榄油=1∶4,V/V),剂量均为10 m L/(kg·BW)。肠道损伤处理后第2天,分别采集3组小鼠十二指肠组织,进行高通量转录组测序。利用获得的测序数据,对差异表达基因进行预测和功能分析以及KEGG信号通路富集,筛选红花清肝13味丸治疗后显著下调信号通路富集的基因群,并与红花清肝13味丸药物靶点基因进行互交分析。[结果](1)转录组测序分析表明,与空白对照组相比,模型组与治疗组分别获得了1 419个和2 875个差异表达基因;与模型组相比,治疗组获得了2 288个差异表达基因,其中,上调表达基因1 139个,下调表达基因1 149个。对模型组差异表达基因进行KEGG信号通路富集,发现被激活的信号通路包括破骨细胞分化﹑B细胞﹑趋化因子﹑炎症性肠病﹑JAK-STAT等;对治疗组差异表达基因进行KEGG信号通路富集,发现被激活的信号通路包括FOXO﹑m TOR﹑长寿调节等,被抑制的信号通路包括破骨细胞分化﹑细胞凋亡﹑肿瘤坏死因子﹑B细胞﹑结肠直肠癌等。(2)筛选出治疗组显著抑制信号通路富集的基因群,与红花清肝13味丸药物靶点基因进行互交分析,进一步筛选出在转录组数据中表达量存在显著差异的4个基因,分别为JUN﹑STAT1﹑NFKBIA、FOS。[结论]CCl4诱导的小鼠肠道损伤以及蒙药红花清肝13味丸治疗过程涉及的主要信号通路包括趋化因子﹑炎症性肠病﹑JAK-STAT﹑长寿调节等,主要基因包括JUN﹑STAT1﹑NFKBIA、FOS。研究结果为明晰蒙药红花清肝13味丸预防及治疗肠道损伤的分子机制提供了参考。
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单位基础医学院; 内蒙古医科大学