摘要
本文旨在研究云上黑山羊多羔性状相关基因WNT11的分子结构特征,结合该基因在高/低产云上黑山羊群体中表达特性及其组织表达谱,分析该基因在多羔性状中的功能。本研究采集20只云上黑山羊高产(H)/低产(L)组个体卵泡期卵巢、下丘脑、垂体、子宫、输卵管组织和血液,分别提取DNA和RNA,随后将RNA反转录成cDNA,设计WNT11特异性引物进行PCR扩增和测序,获得CDS区序列后运用生物信息学方法对序列结构进行分析;以山羊RPL19基因作为内参,在不同组织中使用实时荧光定量进行组织表达谱分析,并在H和L组卵巢组织中对WNT11基因的表达量进行检测。实验结果显示,WNT11基因CDS区全长1 176 bp,共编码391个氨基酸,该基因编码蛋白的二级结构主要由α-螺旋、β-片层延伸、β-转角及无规则卷曲4种结构组成;同源性分析显示,云上黑山羊WNT11基因与绵羊、牛的相似性最高(分别为100%、98.11%),与其他动物相似性也在92.18%~96.51%;组织表达谱显示,WNT11基因在云上黑山羊子宫中表达量最高。RT-qPCR分析表明,WNT11 mRNA在高产云上黑山羊卵巢组织中的表达量显著高于低产云上黑山羊。综上所述,本研究为进一步探讨WNT11基因在山羊繁殖性能中的调控作用提供了依据,为后期深入研究山羊多羔的分子机制奠定了基础。
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