小鼠Reg3α基因cDNA成功转染MIN6细胞株并促其生长

作者：崔巍; 黄葶; 施秉银

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2009, 30(02): 173-176.

• MIN6细胞株
• 胰岛
• Reg基因
• 转染
• 生长

目的建立一过表达Reg3αcDNA的胰岛MIN6细胞株,研究其在低葡萄糖环境中的生长特性。方法将全长Reg3αcDNA插入到质粒载体pcDNA3.1中,并将Reg3-αpcDNA3.1和pcDNA3.1空载体用脂质体法转染胰岛MIN6细胞,分别获得Reg3αcDNA过表达和空载体pcDNA3.1MIN6细胞。应用Real-time PCR和Western blot方法检测这两种细胞在低葡萄糖培养基中Reg3α的表达,并用MTT法测定Reg3α过表达对MIN6细胞生长的影响。结果有三株Reg3α转染的细胞株显示Reg3α的高表达,在空载体转染的MIN6细胞株中未检测到Reg3α的表达,Reg3αmRNA和蛋白水平分别平均升高6~10倍。用Western blot检测发现Reg3α蛋白释放到培养液。采用MTT法测定,与空载体转染的MIN6细胞株相比,三株Reg3α稳定转染细胞株,7 d后细胞数目升高2倍。结论本研究结果表明已成功地建立了过表达Reg3αcDNA的胰岛MIN6细胞。Reg3α可能具有内分泌作用,促进胰岛细胞生长。

• 单位
  西安交通大学