山羊TSPAN6基因克隆及序列分析

作者:陈欣欣; 崔羽茜; 王宁; 任玉鹏; 张焕容; 杨发龙; 朱江江; 向华*
来源:中国畜牧杂志, 2023, 59(10): 133-139.
DOI:10.19556/j.0258-7033.20221124-04

摘要

TSPAN6是四跨膜蛋白超家族成员之一,与病毒毒力、致病性及肿瘤发生相关。本研究旨在克隆山羊TSPAN6基因序列并进行生物信息学分析。以简州大耳羊为实验对象,无菌采集其肝脏,Trizol法提取组织总RNA,并反转录为cDNA,RT-PCR技术克隆山羊TSPAN6基因序列,利用在线软件进行生物信息学分析。结果显示,成功克隆得到TSPAN6基因,共1 400 bp(GenBank登录号:ON337134),包括5’UTR 149 bp,CDS区长738bp,3’UTR23bp,编码245个氨基酸残基。山羊TSPAN6基因序列与绵羊、牛、猪、斑马、海豹和狐狸的相似性分别达到99.32%、98.24%、93.63%、93.90%、92.41%和92.68%。TSPAN6蛋白分子式为C1259H1952N310O346S18,分子质量为27 544.30 Da,是1种偏碱性、稳定的疏水性蛋白。TSPAN6蛋白无信号肽,存在4个跨膜结构域,二级结构显示以α螺旋为主,无β折叠结构,含有1个N糖基化位点与41个磷酸化位点。亚细胞定位预测TSPAN6蛋白主要定位于细胞膜,可能与MAVS、ZFHX4、SEZ6L2等10个蛋白存在相互作用。本实验成功克隆了山羊TSPAN6基因,为后续山羊TSPAN6基因功能的研究提供了参考依据。

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