摘要

目的观察大鼠体外循环后肺组织损伤情况及自噬蛋白的变化, 探讨大鼠体外循环肺损伤是否与自噬有关。方法选取18只健康的雄性SD大鼠, 完全随机分为3组:假手术组(Sham组)、单纯体外循环组(CPB组)和体外循环左肺缺血再灌注损伤组(IR组), 每组6只, 每只大鼠用1%戊巴比妥麻醉后行气管插管辅助通气。Sham组行血管穿刺置管, 暴露左侧肺组织;CPB组行单纯体外循环;IR组建立体外循环左肺缺血再灌注损伤模型。于实验开始时(T1)、开放肺门后10 min(T2)和实验结束时(T3)采集各组大鼠外周动脉血做血气检查, 并计算呼吸指数(RI)和氧合指数(OI)。T3时刻用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的浓度。用蛋白质免疫印迹法检测方法检测左肺组织中自噬相关蛋白微管相关轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin-1及自噬相关基因-5(ATG-5)的浓度。光镜下观察大鼠左肺组织受损程度, 电镜观察左肺组织自噬小体的变化情况。采用单因素方差分析及t检验统计分析。结果 T3时刻, IR组OI低于CPB组(197.00±15.62比286.20±27.65, t=5.364, P<0.05);IR组RI、左肺组织病理评分、TNF-α、IL-6、总蛋白、Beclin-1、ATG-5及LC3-Ⅱ均高于CPB组[1.12±0.20比0.39±0.12、6.17±0.75比3.50±0.55、(315.70±25.43) pg/ml比(174.20±13.11) pg/ml、(146.10±14.88) pg/ml比(88.71±9.50) pg/ml、(224.80±10.54) mg/ml比(127.00±23.96) mg/ml、0.61±0.10比0.32±0.06、0.38±0.01比0.20±0.30、11.98±1.05比7.75±0.97, t=8.865、13.620、12.492、8.252、10.211、7.230、14.244、19.001, P<0.05]。结论 CPB后大鼠肺组织自噬小体及自噬相关蛋白的表达增加, 自噬激活;同时肺功能下降, 肺部炎症严重导致肺损伤。