基于过表达技术的烟草NtGGPPS1基因功能的研究

作者：李锋; 王燃; 武明珠; 郑庆霞; 王中; 王峰; 刘萍萍; 罗朝鹏; 金立锋; 杨军; 魏攀^*

来源：河南大学学报(自然科学版), 2019, 49(02): 180-185.

DOI：10.15991/j.cnki.411100.2019.02.006

• 烟草
• 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因
• 过表达
• 质体色素
• 萜类化合物

将NtGGPPS1-T质粒和spCAMBIA1300载体分别双酶切(SalⅠ和KpnⅠ)后连接,转化,挑取单克隆,筛选得到植物超量表达载体spCAMBIA1300-NtGGPPS1,并通过农杆菌介导侵染栽培烟草K326,在获得阳性转基因烟草后,进行定量RT-PCR以定量分析烟草牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因NtGGPPS1在转基因植株中的转录积累.同时,通过LC-MS和GC-MS检测转基因植株中质体色素和萜类化合物含量的变化.结果显示,与对照组相比,NtGGPPS1基因在编号为Nt1-OE1、2、3、4、7植株中表达上调,阳性转基因烟草中新黄质、紫黄质、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b和β-胡萝卜素6种质体色素,以及烟叶中代表性二萜类物质α-西柏三烯二醇(α-CBD)和β-西柏三烯二醇(β-CBD)的含量明显增加.以上结果表明,NtGGPPS1基因参与了烟草中质体色素和二萜类化合物的生物合成.

• 单位
  中国烟草总公司郑州烟草研究院