LNK基因沉默和过表达对THP-1细胞STAT3表达影响的研究

作者：田润梅; 史良; 容颖; 谭梅; 罗茜; 苏琼; 黄成双; 陈艳^*

来源：中国实验血液学杂志, 2019, 27(05): 1469-1475.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2019.05.018

• THP-1
• 淋巴细胞特异性连接蛋白
• 信号转导
• 转录活化因子3

目的:探讨LNK基因沉默和过表达对人单核细胞白血病细胞(THP-1)STAT3基因表达的影响。方法:培养THP-1细胞;以慢病毒为载体介导SiRNA、LNK(SH2B3)稳定沉默及过表达LNK基因;转染72 h后于倒置荧光显微镜下观察细胞的GFP表达量;应用流式细胞术检测慢病毒感染效率;RT-PCR验证LNK沉默及过表达效应,检测STAT3 mRNA表达量;Western blot检测LNK、STAT3蛋白水平。结果:慢病毒感染72 h THP-1细胞GFP表达量达85%以上,细胞感染效率在99%以上。LNK沉默组LNK及STAT3 mRNA表达量明显低于对照组,而LNK过表达组的LNK和STAT3 mRNA表达水平明显高于对照组(P <0.05)。LNK沉默组LNK、STAT3蛋白水平明显低于对照组,而在LNK过表达组明显高于对照组(P <0.05)。结论:成功建立了LNK基因沉默及过表达的THP-1细胞株。沉默LNK基因导致STAT3表达下调;过表达LNK基因,使STAT3表达上调;此结果提示LNK可能参与了STAT3的调控。

• 单位
  遵义医学院附属医院