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摘要
目的 构建抑制端粒酶活性的 si RNA表达载体。方法 化学合成 2段编码短发夹 RNA序列的、靶向端粒酶 h TERT基因的寡核苷酸 ,各 6 4个碱基 ,退火 ,克隆到经 Bgl 、Hind 双酶切同时 CIP处理后的 p SUPER载体的 pol H1启动子的下游 ,重组构建 RNAi质粒 ,同时设立非特异对照。结果 重组构建的 p SUP- h TE载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析 ,结果表明 6 4个碱基成功插入到预计位点 ,并且序列完全一致。结论 载体的成功构建 ,为进一步研究其对端粒酶活性的抑制作用打下基础。同时使我们发展了在体内合成 si RNA的方法 ,这项技术能广泛的用在分析基因功能、肿瘤治疗等 ,更加便捷地把 RNAi技术用于细胞培养和哺乳动物研究
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