摘要
通过siRNA hsp70干扰大豆蚜后,分析其体内hsp70基因、热休克蛋白70、内源物质和激素表达变化,寻找siRNA干扰效果最明显时间点。利用RNAi技术介导、Real-time qPCR技术、试剂盒,研究分析siRNA hsp70(0.33μg·μL-1)干扰2龄大豆蚜后1、2、3、12、24、48、72 h等处理,其体内hsp70基因、热休克蛋白70、内源物质和激素变化情况。结果表明,siRNA hsp70干扰2龄大豆蚜3 h时,hsp70基因表达量极显著低于清水对照组(P<0.01),显著低于阴性对照组(P<0.05),热休克蛋白70表达量、总糖含量、保幼激素含量极显著低于清水对照组和阴性对照组(P<0.01),羧酸酯酶活性、谷胱甘肽S-转移酶活性、蜕皮激素含量极显著高于清水和阴性对照组(P<0.01)。可知,siRNA hsp70(0.33μg·μL-1)干扰2龄大豆蚜在选测的7个时间处理中,3 h时效果最明显,此时大豆蚜体内各物质含量皆受影响,是开展大豆蚜药剂防治最佳时间点。
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