摘要

目的 研究刺槐素对干眼症(DED)大鼠的保护作用及可能的分子机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白组(不做处理);模型组;0.1%SH组;刺槐素0.1%、0.25%、0.5%组。每组10只,除正常组外,每日4次皮下注射12.5 mg/天氢溴酸东莨菪碱(SCOP),共7天。所有的药物均为在眼球表面局部给药,每只眼睛20μL,每天4次。通过泪液分泌实验检测各组大鼠泪液分泌情况,通过角膜荧光染色检测各组大鼠角膜表面缺损情况,过碘酸雪夫试剂(PAS)染色观察结膜杯状细胞数量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠角膜组织中炎症反应和氧化应激相关指标含量。免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠角膜组织中Toll样受体4(TLR4)通路相关蛋白TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB p65(NF-κB p65)、Pyrin域蛋白3(NLRP3)蛋白表达。结果 与正常组相比,模型组大鼠泪液分泌量、结膜杯状细胞数量明显减少,角膜荧光素染色评分显著升高,但角膜新血管生成评分减少,同时角膜组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10、丙二醛(MDA)水平上调,而超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量则下调,TLR4、MyD88、NLRP3、p-NF-κB p65蛋白相对表达量均升高(P<0.05);与模型组相比,经刺槐素0.25%、0.5%组治疗后,大鼠泪液分泌量、结膜杯状细胞数量明显增加,角膜荧光素染色评分显著降低,角膜新血管生成评分显著增加,同时角膜组织中IL-1β、TNF-α、IL-10、MDA水平下调,而SOD和GSH-Px含量则上调(P<0.05),尤其是刺槐素0.5%组上述指标变化更明显,而且角膜组织中TLR4、MyD88、NLRP3、p-NF-κB p65蛋白相对表达量较模型组显著降低(P<0.05)。结论 刺槐素对干眼症大鼠具有保护作用,其保护机制与抑制干眼症大鼠的氧化应激反应、炎症反应和TLR4/MyD88/NLRP3通路活性有关。

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