摘要
目的 利用温敏凝胶制备基质细胞衍生因子-1(stromall cell derived factor-1, SDF-1)/壳聚糖(chitosan, CS)/β-甘油磷酸钠(β-sodium glycerphosphate, β-GP)复合生物膜并观察其体外生物学特性。方法 制备CS/β-GP溶液并添加SDF-1混匀,观察其37℃时凝胶时间的变化。将凝胶铺膜、干燥形成SDF-1/CS/β-GP复合生物膜,扫描电镜观察其形貌特征。将复合生物膜置于含细胞培养液的六孔板,静置6、12、24、36、48、60 h后提取上清液(n=3),测定溶液SDF-1浓度变化。将Transwell小室上室中加入骨髓间充质干细胞(BMSCs),下室置入复合生物膜,分为4组(n=3):M0组即对照组(CS/β-GP膜);M1、M2、M3组均为SDF-1/CS/β-GP膜组,分别含100、200、400 ng/mL SDF-1。分别于6、12、24 h对膜下细胞Giemsa染色观察和MTT法测定光密度(OD)值计算细胞增殖率。采用SPSS 19.0进行多因素方差分析。结果 CS/β-GP溶液加入一定量的SDF-1后其凝胶时间无明显变化(P>0.05);SDF-1/CS/β-GP溶液在37℃条件下铺膜、干燥后形成多孔隙结构的半透明生物膜;SDF-1/CS/β-GP复合生物膜缓释SDF-1的体积质量随时间延长而逐渐增加(P<0.01);Transwell细胞迁移实验,BMSCs定向迁移的数量随着时间延长而增加(P<0.01),随着复合膜负载SDF-1体积质量增高而增加(P<0.01);MTT实验,迁移细胞OD值随着时间延长而增加(P<0.01),随着复合膜负载SDF-1体积质量增高而增加(P<0.01)。结论 SDF-1/CS/β-GP复合生物膜具有多孔隙结构并能趋化BMSCs定向迁移,是一种有应用潜力的引导组织再生膜。
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单位济南市口腔医院