HPLC测定大豆皂苷方法的建立和优化

作者:殷丛丛; 李文帅; 徐海军; 谈美霞; 王敏; 赵晋忠; 杜维俊; 岳爱琴*
来源:山西农业科学, 2021, 49(06): 705-710.

摘要

为了实现大豆皂苷的快速分离及含量测定,采用高效液相色谱法(HPLC)对4种大豆皂苷(Aa、Ab、Ba、Bb)进行分析检测,建立并优化采用高效液相色谱法(二极管阵列检测器)测定4种大豆皂苷的条件,并采用外标法进行定量分析。结果表明,采用HPLC法测定大豆皂苷的最优条件为:色谱柱ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相A为0.05%的乙酸乙腈溶液,流动相B为0.05%的乙酸水溶液,进样30μL,流速1.0 m L/min,检测波长205 nm。大豆皂苷在100~1 000μg/m L范围内线性关系良好,4种大豆皂苷线性相关系数均不低于0.997,大豆皂苷Aa、Ab的检测下限为20μg/m L,Ba、Bb的检测下限为10μg/m L;加标检出率为89.9%~105.6%,相对标准偏差为1.06%~2.31%。该方法操作简单、准确度高、重现性好,可用于大豆种子中4种大豆皂苷的定性定量检测。