血液系统条件性DNMT3B基因敲除小鼠的构建及鉴定

作者：李福兴; 胡超; 何薇; 乔晓红; 谢晓恬

来源：中国现代医学杂志, 2018, 28(06): 23-27.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2018.06.004

• DNMT3B
• 基因敲除
• Cre/loxp系统
• 小鼠

目的构建可在血液系统中条件性敲除DNMT3B基因小鼠并进行鉴定,为研究DNMT3B基因的生物学功能及其在血液肿瘤疾病的作用机制提供动物模型。方法将引进的DNMT3Bflox/flox小鼠与Mx1-Cre+小鼠进行杂交繁殖,得到基因型DNMT3Bflox/+Mx1-Cre+及DNMT3Bflox/+Mx1-Cre-两种子代,再用这两种子代杂交产生子代小鼠,通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型;获得基因型为DNMT3Bflox/flox Mx1-Cre+的小鼠,通过腹腔注射p I-p C共5次诱导DNMT3B敲除,然后用半定量PCR方法鉴定DNMT3B基因敲除情况。结果基因型鉴定确认在13只子鼠中有2只为DNMT3Bflox/flox Mx1-Cre+,经p I-p C腹腔注射后,DNMT3B基因通过Cre/lox P系统被成功敲除。结论该方法成功构建可以在血液系统条件性敲除DNMT3B基因的小鼠,并进行敲除后鉴定。

• 单位
  复旦大学附属中山医院; 同济大学; 同济医院