阿托伐他汀通过激活转录因子EB对泡沫细胞自噬及胆固醇含量的影响

作者：张伟; 陈雨露; 黄维义; 杜延飞; 涂婷; 郑舒展^*

来源：医学研究生学报, 2020, 33(04): 370-376.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2020.04.006

• 阿托伐他汀
• 转录因子EB
• 自噬
• 胆固醇
• 泡沫细胞

目的最新研究发现转录因子EB(TFEB)在调节自噬减少细胞内脂质,抑制动脉粥样硬化上起着重要作用。文中旨在探索阿托伐他汀(ATV)通过激活TFEB对泡沫细胞自噬及胆固醇含量的影响。方法体外培养人单核细胞株THP-1,使用佛波酯诱导分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(oxLDL),诱导48 h建立泡沫细胞模型。实验分为空白组、oxLDL组、oxLDL+氯喹组、oxLDL+ATV组、oxLDL+氯喹+ATV组。各组细胞均加入药物处理48 h,采用CCK8法检测ATV及氯喹对细胞的毒性;油红0染色观察细胞内脂滴的含量;采用氧化酶法检测细胞内游离胆固醇(FC)、总胆固醇(TC)等含量;胆固醇外流荧光分析法分析测定细胞胆固醇外流率;Western blot检测LC3II/I、P62、TFEB、LAMP 1蛋白的表达情况。结果 oxLDL+氯喹组细胞内脂滴较oxLDL组、oxLDL+氯喹+ATV组明显增加(P<0.05),而oxLDL+ATV组较oxLDL组明显降低(P<0.05)。oxLDL+ATV组、空白组细胞内FC、TC、CE、CE/TC含量较oxLDL组明显降低(P<0.05); oxLDL+氯喹+ATV组细胞内FC、TC、CE及CE/TC含量(0.063±0.006、0.124±0.009、0.056±0.007及0.496±0.039)较oxLDL+氯喹组(0.076±0.004、0.179±0.005、0.103±0.008及0.576±0.032)明显降低(P<0.05);oxLDL+氯喹组FC、TC、CE、CE/TC含量较oxLDL组明显升高(P<0.05)。与oxLDL组细胞胆固醇外流率比较,oxLDL+氯喹组明显降低(P<0.05),空白组、oxLDL+ATV组明显升高(P<0.05);与oxLDL+氯喹组细胞胆固醇外流率[(9.554±1.387)%]比较,oxLDL+氯喹+ATV组[(14.574±2.017)%]明显增加(P<0.05)。与oxLDL+氯喹组细胞TFEB、LAMP1蛋白表达水平(0.477±0.024、0.957±0.026)比较,oxLDL+氯喹+ATV组(0.593±0.016、1.060±0.046)明显升高(P<0.05), LC3II/I、P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 ATV可以提升巨噬细胞胆固醇外流率,降低巨噬细胞内胆固醇及脂滴含量,减少泡沫细胞形成,其机制可能与ATV激活TFEB,影响自噬的发生过程有关。

• 单位
  神经内科; 西南医科大学