宁夏银川地区奶牛毕氏肠微孢子虫的感染情况与基因型鉴定

作者：黎玉琼; 于有利^*; 郜军荣; 刘芸芸; 李红兵; 牛晓昊

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(04): 476-485.

• 毕氏肠微孢子虫
• 感染
• 内部转录间隔区
• 巢式PCR
• 银川

目的 明确宁夏银川地区奶牛毕氏肠微孢子虫的感染情况及其主要基因型。方法 2021年8月—2022年8月，在银川市及周边县6个规模化奶牛场采集奶牛新鲜粪样(包括腹泻粪样和非腹泻粪样)，提取粪样基因组DNA，用毕氏肠微孢子虫内部转录间隔区(ITS)引物进行巢式PCR，回收PCR产物后送测序并进行BLAST比对，鉴定毕氏肠微孢子虫基因型。采用SPSS 25.0软件进行分析，不同月龄奶牛毕氏肠微孢子虫阳性率差异的比较采用χ2检验。结果 共采集奶牛粪样772份，巢式PCR扩增结果显示，奶牛毕氏肠微孢子虫阳性率为8.7%(67/772)，目的条带大小约为400 bp。不同牧场的奶牛毕氏肠微孢子虫阳性率为4.8%(6/124)～11.5%(18/156)，差异有统计学意义(χ2=30.828,P <0.05)。5～7月龄犊牛的阳性率最高(15.6%,23/147),12月龄以上育成牛的最低(3.4%,5/149)，不同月龄的奶牛阳性率差异有统计学意义(χ2=59.529,P <0.05)。腹泻粪样中毕氏肠微孢子虫的阳性率为10.6%(42/398)，高于非腹泻粪样(6.7%,25/374)(χ2=3.419,P <0.05)。测序共检出66条毕氏肠微孢子虫序列，分为CHN4、BEB4、J、I型等4种基因型，提交GenBank获得的登录号分别为OR352930、 OR352929、 OR352932和OR352931。其中CHN4型3条(占4.5%)，与G1亚群CHN4基因型(HM992511)的序列一致性为98.4%;BEB4型18条(占27.3%)，与G2亚群BEB4基因型(AY331008)的序列一致性为96.3%;J型22条(占33.3%)，与G2亚群J基因型(AF135837)的序列一致性为93.1%;I型23条(占34.9%)，与G2亚群I基因型(AF135836)的序列一致性为91.1%。不同月龄奶牛感染的毕氏肠微孢子虫的优势基因型不同，BEB4型、J型和I型毕氏肠微孢子虫在奶牛的各个月龄段均存在，3种基因型的总和分别占阳性腹泻粪样和阳性非腹泻粪样的88.1%(37/42)和60.0%(15/25)，二者差异有统计学意义(χ2=3.419,P <0.05)。结论 宁夏银川地区奶牛存在毕氏肠微孢子虫感染，主要基因型为BEB4、J和I基因型。

• 单位
  宁夏农林科学院动物科学研究所; 宁夏农垦贺兰山奶业有限公司