hTERT基因片段真核表达质粒载体的构建

作者：王萍; 侯续伟; 尹波; 任甫

来源：中国医科大学学报, 2010, (05): 343-345.

• 人端粒酶逆转录酶
• 表达载体
• 基因转染
• 永生化 human telomerase reverse transcriptase
• expression vector
• gene transfection
• immortalization

目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的基因表达载体,为人们建立永生化的细胞系提供材料,为临床细胞移植的实验研究和疾病治疗奠定实验基础。方法根据hTERT全长cDNA序列设计引物进行PCR扩增,扩增用的模板是人胎脑cDNA文库,PCR扩增产物与pGEM-T载体连接后进行测序鉴定。结果 PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。产物测序表明,hTERT基因片段与GenBank公布的相应基因同源性比较,核苷酸序列的同源性为98.87%,氨基酸序列的同源性为99.67%。结论成功构建了hTERT真核表达质粒。

• 单位
  锦州医科大学; 辽宁医学院附属第一医院