脆木耳基因组DNA提取方法优化

作者:王艺琴; 郭豪; 张素勤; 耿广东*
来源:中国食用菌, 2022, 41(04): 48-52.
DOI:10.13629/j.cnki.53-1054.2022.04.010

摘要

木耳属子实体含有大量多糖、蛋白质和色素等物质,严重干扰基因组DNA (gDNA)的提取,普通方法难以提取脆木耳子实体的高质量gDNA。以脆木耳子实体为试材,利用4种方法提取gDNA,以期筛选出最佳的提取方法。结果表明,4种方法提取的脆木耳子实体gDNA浓度及纯度各不相同。改良CTAB法提取的脆木耳子实体gDNA浓度和纯度最低;CTAB-free法提取的gDNA浓度较低,且有明显的蛋白污染;试剂盒法虽可提取出较高浓度的gDNA,但其纯度较低;试剂盒联合CTAB-free法可以有效提取出浓度和纯度都较高的gDNA。使用内参基因木耳多聚泛素(UBQ)引物对4种方法提取的g DNA进行PCR扩增,试剂盒联合CTAB-free法提取的g DNA可以扩增出清晰的目标条带,证明该方法提取的gDNA可用于后续分子生物学分析。

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