BMP-2、iRoot BP Plus联合对牙髓细胞成牙本质分化的实验研究

作者：李珍珍; 柴文宇; 殷亮亮; 李春年^*

来源：现代口腔医学杂志, 2022, 36(05): 309-315.

• 牙髓细胞
• BMP-2
• iRoot BP Plus
• 增殖分化

目的 研究BMP-2、iRoot BP Plus、BMP-2与iRoot BP Plus联合对牙髓细胞增殖、分化方面的影响，以期为活髓保存治疗提供实验参考。方法 采用改良组织块酶消化法进行人牙髓细胞（hDPCs）的原代及传代培养。经流式细胞仪对所培养的牙髓细胞进行鉴定。取生长状态良好的3-5代牙髓细胞分为四组：A组为对照组，B、C、D组分别加入0.2 mg/mL iRoot BP Plus、0.2 mg/mL iRoot BP Plus+100 ng/mL BMP-2及100 ng/mL BMP-2。培养1、3、5、7 d后绘制各组细胞生长曲线；培养5、7 d通过qPCR检测成牙本质相关基因ALP、DSPP、BSP的mRNA相对表达量；培养7、14d行ALP活性检测。结果 成功分离培养出人牙髓细胞，经流式细胞仪检测证明所培养的牙髓细胞具有间充质干细胞特性。随着培养时间的延长，各组牙髓细胞OD值逐渐增长，3～5 d时为对数增长期，7 d以后缓慢增长；培养第1 d各组OD值之间无明显差异（P>0.05），第3、5、7 d时C组OD值均高于其它各组，差异具有统计学意义（P<0.05），其中第3、5 d时B组与D组之间无明显差异（P>0.05），第7 d时D组OD值明显高于B组OD值，差异具有统计学意义（P<0.05）。qPCR结果显示：培养5 d时，除BSP基因外，ALP、DSPP基因mRNA相对表达量均提高，其中C组显著高于B、D组，D组高于B组，差异具有统计学意义（P<0.05）；培养7 d时，各组基因表达量均上调，DSPP、ALP、BSP基因mRNA相对表达量均高于A组，其中C组高于B、D组，D组高于B组，差异具有统计学意义（P<0.05）。ALP活性检测显示：培养7、14 d时，B、C、D组ALP活性均高于A组，其中C组最高，D组次之，最后是B组，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 BMP-2较iRoot BP Plus在诱导hDPCs增殖、分化方面更具优势；两者联合可发挥协同作用，较单独使用对人牙髓细胞增殖及成牙本质分化有明显促进作用。

• 单位
  河北医科大学