华南虎源铜绿假单胞菌的分离鉴定及其生物学特性研究

作者:李雨琪; 吴林悦; 黄林洁; 朱智豪; 许静茹; 蔡思思; 周娴静; 邓莹滋; 靳雨欣; 陈芳婷; 林开雄; 陈腾腾; 林锡潘; 林俊宏; 黄雨欣; 许癸宗; 俞国华*; 范克伟*
来源:中国兽医科学, 2023, 53(06): 715-726.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0107

摘要

为探明福建省梅花山华南虎繁育研究所1只3岁华南虎公虎的死亡原因,无菌采集死亡虎的肝、脾、肺等组织样本,并接种于鲜血琼脂培养基分离优势细菌,利用表型特性及16S rRNA基因序列分析鉴定分离菌株;通过毒力基因检测、小鼠致病性试验、药敏试验及耐药基因检测对分离菌株进行致病性和耐药性研究。结果显示,从死亡华南虎肝组织中分离到1株铜绿假单胞菌,命名为FJ/Tiger-201801;该分离菌与26株铜绿假单胞菌16SrRNA的核苷酸序列同源性为97.1%~99.6%,其中与水貂源CS-20株、林麝源FMDP002株、人源Kasamber2株的同源性高达99.6%;毒力基因检测结果显示,该分离菌携带exoT、exoS、exoY这3种毒力基因;动物致病性试验结果显示,该分离菌对小鼠具有较强的致病性,试验小鼠在攻毒后13 h内全部死亡,并对死亡小鼠的肝、肺、脾等组织器官造成了严重的病理组织损伤;对11类30种常用抗菌药物的药敏试验结果显示,该分离菌株对氨苄西林等其中8类18种抗菌药物均表现耐药,对多黏菌素B等6种抗菌药物表现中度敏感,仅对头孢吡肟、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、妥布霉素和哌拉西林这6种抗菌药物表现敏感;对8类35种耐药基因检测结果显示,该分离菌同时携带有喹诺酮类、β-内酰胺类和四环素类抗菌药物的6种耐药基因。综上,本研究从死亡华南虎肝组织中分离获得了1株具有较强致病力且耐药严重的铜绿假单胞菌,为华南虎等野生动物铜绿假单胞菌病的防控提供了重要的参考依据。

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