芘二聚体发夹探针用于细胞DNA单链断裂修复能力的评估

作者：李印; 刘劲松; 王禹; 祁婷婷; 孟乐园; 张晶; 吕冬梅; 焦虎平

来源：高等学校化学学报, 2023, 44(11): 142-150.

• 单链断裂修复
• 芘二聚体
• 发夹探针
• 原代细胞
• 肿瘤细胞

基于芘分子二聚体的荧光特性设计了一种新型的发夹探针,用于评估不同细胞的单链断裂修复(SSBR)能力.首先利用芘荧光分子设计一个茎上有缺口的DNA发夹探针,该探针在Bst DNA聚合酶作用下可以水解,使荧光信号“关闭”.如果探针茎上的缺口被DNA修复酶修复,可以阻止Bst DNA聚合酶对探针的消化作用,从而阻止荧光信号的“关闭”.该设计可以用于评估细胞的SSBR能力,并通过提取细胞的核蛋白考察了不同细胞的SSBR能力.研究结果表明,肿瘤细胞及细胞系不具有原代细胞的SSBR能力.利用SSBR的关键酶进一步探索了肿瘤细胞SSBR能力缺失的原因,证明是由于肿瘤细胞中含有可以抑制SSBR过程的活性物质.此外,该方法能够同时进行500个细胞的SSBR能力检测,并用于抗衰老药物筛选.

• 单位
  吉林大学; 动物科学学院