高糖环境下TLR7/MyD88/NF-κB在HK-2细胞缺氧复氧损伤中的作用机制

作者：黄亚医; 黄婷; 王雅枫; 赵博; 周芳; 肖业达^*

来源：山西医科大学学报, 2018, 49(12): 1437-1441.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2018.12.006

• HK-2细胞
• Toll样受体7
• 高糖
• 缺氧复氧损伤
• 氧化应激

目的探讨高糖环境下TLR7/MyD88/NF-κB信号通路在人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧复氧损伤中的作用。方法随机将HK-2细胞分为3组(n=6):高糖组(HG组),高糖缺氧复氧组(HH/R组),高糖缺氧复氧+TLR7基因沉默组(HH/R-siRNA组)。采用高糖刺激72 h建立高糖模型,缺氧4 h复氧2 h建立缺氧复氧模型。采用CCK-8和乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞活性,酶标仪测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)的含量,ELISA法检测细胞内IL-6和TNF-α水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blotting法检测肾脏细胞TLR7,MyD88和NF-κB蛋白的表达。结果 TLR7-siRNA转染率为72. 56%。与HG组相比,HH/R组细胞活性下降及SOD活性下降,LDH、MDA、IL-6、TNF-α、细胞凋亡率、TLR7、MyD88及NF-κB蛋白表达增多(均P <0. 05);与HH/R组相比,HH/R-siRNA组细胞活性及SOD活性上升,LDH、MDA、IL-6、TNF-α、细胞凋亡率、TLR7、MyD88及NF-κB蛋白表达减少(均P <0. 05)。结论高糖环境中,TLR7/MyD88/NF-κB信号通路参与了HK-2细胞缺氧复氧损伤。抑制TLR7/MyD88/NF-κB信号通路,可以减轻缺氧复氧引起的细胞毒性损伤,降低氧化应激和炎症反应,减少细胞凋亡从而减轻缺氧复氧损伤。

• 单位
  武汉大学人民医院