摘要

目的 采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)联合缺氧制备大鼠心肌细胞肥大模型并探讨其应用。方法 采用不同浓度AngⅡ作用不同时间和/或不同时间缺氧处理诱导大鼠心肌细胞H9c2(2-1)肥大,观察心肌细胞存活率,测定培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞内总蛋白和肥大标记物心钠肽(ANP)含量,初步确定AngⅡ作用浓度和时间;进一步检测细胞内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达,再结合培养上清中LDH的活性,最终确定最佳造模条件。通过HIF-1α抑制剂牡荆素作用肥大H9c2细胞后检测胞内ANP和游离脂肪酸(FFA)含量、测定细胞内HIF-1α蛋白表达,培养上清中葡萄糖水平来进行模型应用。结果 10-6 mol/L AngⅡ作用24 h联合缺氧4 h可诱导大鼠心肌细胞肥大。牡荆素可降低肥大H9c2细胞内ANP、FFA含量及HIF-1α蛋白表达,提高培养液上清中葡萄糖水平。结论 AngⅡ联合缺氧培养可成功制备大鼠心肌细胞肥大模型,该模型可应用于抗心肌肥厚药物的体外研究。

  • 单位
    苏州大学附属儿童医院