微小RNA-145靶向调控SOX11表达及其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

作者：郭辉; 张斌; 胡利民

来源：临床肿瘤学杂志, 2018, 23(03): 200-205.

• 乳腺癌
• 微小RNA-145
• 性别决定区Y框蛋白11(SOX11)
• 增殖
• 凋亡

目的探讨微小RNA-145(miR-145)对性别决定区Y框蛋白11(SOX11)的靶向调控作用及对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测正常乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MDA-MB-231细胞中的miR-145的表达水平;选取对数生长期MDA-MB-231细胞,采用脂质体法分别转染miR-145模拟物mimics(过表达组)或阴性对照质粒NC(阴性对照组),以未行转染的细胞为空白对照组;采用QPCR检测转染48 h后各组miR-145的表达水平,采用CCK-8和AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组细胞的增殖率和凋亡率,QPCR和Western blotting检测各组转染48 h后SOX11 mRNA和蛋白水平,采用荧光素酶报告实验验证miR-145与SOX11的靶向调控关系。结果 HBL-100细胞的miR-145表达水平为1.047±0.026,高于MDA-MB-231细胞的0.218±0.019(P<0.05)。空白对照组、阴性对照组和过表达组的miR-145表达水平分别为1.022±0.034、0.987±0.028和3.408±0.097,过表达组的miR-145表达水平高于其余两组(P<0.05);过表达组转染48、72 h后的增殖率均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。空白对照组、阴性对照组和过表达组的凋亡率分别为(6.12±0.79)%、(7.12±0.82)%和(26.11±1.95)%,SOX11 mRNA水平分别为1.066±0.074、1.105±0.091和0.126±0.023,SOX11蛋白水平分别为0.524±0.048、0.492±0.056和0.173±0.038,过表达组的凋亡率高于其余两组,SOX11 mRNA和蛋白水平低于其余两组(P<0.05)。荧光素酶活性检测结果显示miR-145可抑制野生型SOX11 3’UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型SOX11 3’UTR的荧光素酶活性无影响。结论 miR-145在乳腺癌细胞中表达降低,可与SOX11 3’UTR特异结合,调控乳腺癌细胞的增殖和凋亡,有可能成为乳腺癌新的生物治疗靶点。