PTD-eGFP-△E250 mFoxp3融合蛋白的表达与穿膜能力鉴定

作者：蔺昕; 宗扬勇; 许逊; 田雨香; 陈勋; 舒新军; 夏圣; 王胜军; 许化溪; 邵启祥

来源：江苏大学学报(医学版), 2009, (01): 14-18+22+95.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.2009.01.001

• 蛋白质转导结构域
• Foxp3
• 突变
• 穿细胞膜活性 protein transduction domain
• Foxp3
• mutant
• transmembrane ability

目的:构建、表达并纯化含有蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)、eGFP的小鼠Foxp3突变体(PTD-eGFP-△E250 mFoxp3)融合蛋白,为研究小鼠Foxp3的功能奠定基础。方法:利用重叠延伸PCR方法构建pET28a-PTD-eGFP-△E250 mFoxp3原核表达载体,并在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中表达此融合蛋白,经Ni2+柱纯化,通过流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察其穿膜效率。结果:成功构建了pET28a-PTD-eGFP-△E250 mFoxp3原核表达载体,并表达和纯化了PTD-eGFP-△E250 mFoxp3融合...

• 单位
  江苏大学