hBMP-7基因重组腺相关病毒载体的构建及人牙髓细胞转染的研究

作者：石建峰; 李昂; 饶国洲; 厉强

来源：陕西医学杂志, 2008, (01): 73-75+79.

• 转染
• 细胞
• 牙髓
• 基因重排
• 骨形态发生蛋白质类 Transfection Cells Dental pulp Gene rearrangement Bone morphogenetic proteins

目的:构建人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因重组腺相关病毒载体,并转染牙髓细胞,为牙组织损伤修复的基因治疗做探索性研究。方法:以含hBMP-7全长cDNA的载体PTcDNA-hBMP-7为模板进行PCR扩增,将回收产物和pAAVIRES-hrGFP分别双酶切后连接、转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,获得重组质粒pAAVIRES-hrGFP-hBMP-7。采用磷酸钙共沉淀法转染293细胞进行病毒包装,收获的病毒液按氯仿处理、PEG/NaCl沉淀、酚:氯仿反复抽提法浓缩纯化,斑点杂交法测病毒滴度,并转染体外培养的牙髓细胞。结果:酶切鉴定和测序结果表明,hBMP-7基因成功克隆入pAAVIRES-h...

• 单位
  西安交通大学医学院第二附属医院; 西安交通大学口腔医院