细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)敲除和人源化小鼠模型的建立

作者：黄艺滢; 张文龙; 石桂英; 雷雪裴; 高苒^*; 白琳^*

来源：中国实验动物学报, 2021, 29(03): 307-315.

• 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4
• 人源化
• 基因敲除
• 小鼠

目的建立细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)基因人源化小鼠模型,为靶向CTLA4的肿瘤治疗性抗体研发和筛选提供有效的小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9技术,建立CTLA4基因人源化和敲除小鼠模型,利用PCR、RT-PCR、Western Blot、免疫组织化学和流式细胞术的方法对其进行鉴定及分析。将小鼠黑色素瘤细胞株(B16)注射到CTLA4人源化小鼠皮下,观察腹腔注射CTLA4单克隆抗体伊匹木(ipilimumab)的抗肿瘤效果。结果 CTLA4人源化小鼠可以稳定表达人源CTLA4,而不表达鼠源CTLA4。CTLA4人源化小鼠出生后6个月内正常存活,组织病理学及免疫系统未见明显异常。同时在CTLA4人源化小鼠中,伊匹木减缓肿瘤生长速度。CTLA4基因敲除小鼠不表达CTLA4基因,在出生后3～5周内由于自身免疫疾病死亡。结论同时建立了CTLA4人源化和敲除小鼠。CTLA4人源化小鼠可用于筛选与CTLA4基因相关的治疗性抗体或药物。

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院医学实验动物研究所