应用酵母双杂交方法筛选与鉴定组蛋白乙酰基转移酶hTIP60β相互作用蛋白

作者：黄轶; 曾昭淳

来源：第三军医大学学报, 2010, 32(14): 1495-1498.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2010.14.006

• 组蛋白乙酰基转移酶
• TIP60β
• 酵母双杂交 histone acetyltransferases
• TIP60β
• yeast two-hybrid

目的克隆人组蛋白乙酰基转移酶TIP60β基因,应用酵母双杂交技术研究筛选与TIP60β发生相互作用的蛋白。方法运用RT-PCR方法从人脑组织克隆TIP60β cDNA,构建酵母双杂交BD诱饵载体pGBKT7-TIP60β,以其为诱饵从成人肝cDNA文库中筛选与之相互作用的阳性克隆,并对阳性克隆进行序列测定和相关生物学分析。结果诱饵载体pGBKT7-TIP60β经双酶切可释放出1443bp DNA片段,与理论值大小一致,测序比对分析表明序列正确。以其为诱饵经酵母双杂交筛选共获得32个克隆,进一步验证与测序分析,最终确认HDAC7A、DMD2、CREB1、BD73、PHF17、AR等9个克隆基因。...

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属儿童医院